糞大腸菌群的測定方法一般分為兩種，一種是濾膜法，一種是多管發酵法，下面喆圖小編給大家介紹一下用電熱恒溫培養箱進行水質糞大腸菌群的測定實驗步驟：

一、濾膜法
      水樣的選擇根據細菌受檢驗的特征和水樣中預測的細菌密度而定。如未知水樣中糞大腸菌的密度，就應按下表所列體積過濾水樣，以得知水樣的糞大腸桿菌密度。先估計出適合在濾膜上計數所應使用的體積，然后再取這個體積的1/10和10倍，分別過濾。理想的水樣體積是一片濾膜上生長20～60個糞大腸菌群菌落，總菌落數不得超過200個。
      濾膜及濾器的滅菌：將濾膜放入燒杯中，加入蒸餾水，置于水浴鍋中煮沸滅菌三次，每次15min。前兩次煮沸后需更換水洗滌2～3次，以除去殘留溶劑。也可用121°C滅菌10min，10min一到，迅速將蒸汽放出，這樣可以盡量減少濾膜上凝集的水分。濾器、接液瓶和墊圈分別用紙包好，在使用前先經121°C滅菌30min。濾器滅菌也可用點燃的酒精棉球火焰滅菌。
       過濾：用無菌鑷子夾取滅菌濾膜邊緣，將粗糙面向上，貼放在已滅菌的濾床上，穩妥地固定好濾器。將適量的水樣注入濾器中，加蓋，開動真空泵即可抽濾除菌。
       培養：使用M−FC培養基。培養基含或不含瓊脂，不含瓊脂的培養基使用已用M-FC培養基飽和的無菌吸收墊。將濾過水樣的濾膜置于瓊脂或吸收墊表面。將培養皿緊密蓋好后，置于能準確恒溫于44.5°C±0.5°C的電熱恒溫培養箱或恒溫水浴鍋中，經24h±2h培養。若用恒溫水浴鍋培養，則需用防水膠帶貼封每個平皿，將培養皿成疊封入防水塑料袋或容器內，浸沒在44.5°C±0.5°C恒溫水浴鍋中。在培養時間內，裝培養皿的塑料袋必須用重物墜于水面之下，以保持所需的嚴格溫度。所有已制備的培養物都應在過濾后30min內浸入水浴鍋內。
二、多管發酵法
       水樣接種量將水樣充分混勻后，根據水樣污染的程度確定水樣接種量。每個樣品至少用三個不同的水樣量接種。同一接種水樣量要有五管。相對未受污染的水樣接種量為10mL、1mL、0.1mL。受污染水樣接種量根據污染程度接種1mL、0.1mL、0.01mL或0.1mL、0.01mL、0.001mL等。
       接種體積為10mL，則試管內應裝有三倍濃度乳糖蛋白胨培養液5mL；如接種量為1mL或少于1mL，則可接種于普通濃度的乳糖蛋白胨培養液10mL中。
       初發酵試驗    將水樣分別接種到盛有乳糖蛋白胨培養液的發酵管中。在37°C±0.5°C電熱恒溫培養箱中培養24h±2h。產酸和產氣的發酵管表明試驗陽性。如在倒管內產氣不明顯，可輕拍試管，有小氣泡升起的為陽性。
       復發酵試驗    輕微振蕩初發酵試驗陽性結果的發酵管，用3mm接種環或滅菌棒將培養物轉接到EC培養液中。在44.5°C±0.5°C溫度下培養24h±2h（水浴鍋的水面應高于試管中培養基液面）。接種后所有發酵管必須在30min內放進水浴中。培養后立即觀察，發酵管產氣則證實為糞大腸菌群陽性。

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